ምርቶች

በርካታ የ5-fluorouracil (5-FU) ሜታቦሊቶች እና ሁለት ውስጣዊ ሞኖፎስፌት ኑክሊዮታይዶችን ለመለካት በፈሳሽ ክሮማቶግራፊ–ታንደም mass spectrometry (LC-MS/MS) ላይ የተመሰረተ ኦሪጅናል ዘዴ ፈጠርን።ይህ ምርመራ የሚከተሉትን ለመወሰን ፈቅዷል፡ (i) 5-fluoro-2′-deoxyuridine-5′-monophosphate (5-FdUMP) ከ5-FU ወይም 5-fluoro-2′-deoxyuridine (5-FdUrd) ውስጠ-ህዋስ ምርት , (ii) የ 5-FdUMP ትኩረት በሴሉላር 2′-deoxyuridine-5′-monophosphate (dUMP)/thymidine-5′-monophosphate (TMP) ጥምርታ እና (iii) የ5-FdUMP መጠን እና የምስጢር መጠን ላይ የሚያሳድረው ተጽዕኖ። 5-FU ከሰዎች የሰለጠኑ ሴሎች በኤቢሲ ማጓጓዣዎች.በእኛ የሙከራ ሁኔታ፣ ሴሎች ከ5-FU ወይም 5-FUrd ጋር ተፈጥረዋል።ከዚያም ሴሉላር ፕሮቲኖች በሜታኖል ተወስደዋል.ይህ አሰራር ከፍተኛ የማውጣት መልሶ ማግኛን ሰጥቷል.በተጨማሪም ከሴሎች ውስጥ 5-FU እና 5-FdUMP ሚስጥሮችን ለመለካት እነዚህን ሞለኪውሎች በባህላዊ ሚዲያ ውስጥ መለካት አደረግን.ሚዲያ በቀጥታ የተወጉ ነበር (5-FU) ወይም Oasis Wax Extraction cartridge (5-FdUMP) በመጠቀም በጠንካራ ደረጃ ማውጣት ችለዋል።የትንታኔ መለያየት በ dC18 Atlantis 3.5 μm (100 ሚሜ × 2.1 ሚሜ መታወቂያ) አምድ በአይሶክራቲክ ሁነታ በአሞኒየም ፎርማት ቋት/ሜታኖል/ውሃ (5/5/90፣ v/v) እንደ የሞባይል ደረጃ በመጠቀም ተካሂዷል።የሩጫው ጊዜ ከ 6.2 ደቂቃዎች በላይ አልሆነም.ትንታኔዎቹ በአሉታዊ ion ሁነታ ውስጥ በኤሌክትሮስፕራይ በይነገጽ ውስጥ ionized ተደርገዋል.ዘዴውን በ 2.5-150 ng ml -1 ውስጥ እንደ ውህዶች አረጋግጠናል.በሰባት ቀናት ውስጥ የውስጠ-እና የእርስ-አሳይ ልዩነት ከ 10% ያነሰ ነበር።ናሙናዎች በ -20 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ቢያንስ ለሁለት ሳምንታት ሲቀመጡ እና ከሶስት የቀዘቀዙ ዑደቶች በኋላ ሁሉም ውህዶች በሴሎች ውስጥ ወይም በባህል መካከለኛ ውስጥ የተረጋጋ ነበሩ።በሁለቱም ሚዲያዎች ምንም የማትሪክስ ውጤት አልታየም።