ምርቶች

ረቂቅ ተሕዋስያን አስተናጋጁን (metabolism) መረዳቱ የምርት ቅልጥፍናን ስለሚያመለክት ሙሉ ሴል ላይ የተመሰረቱ ባዮኬቲክ ሂደቶችን ለማዳበር እና ለማመቻቸት አስፈላጊ ነው.ይህ በተለይ ለ redox biocatalysis እውነት ነው ፣ ሜታቦሊዝም ንቁ ህዋሶች በሚሰሩበት ጊዜ በአስተናጋጁ ውስጥ ባለው የ cofactor/cosubstrate regenerative አቅም ምክንያት።Recombinant Escherichia ኮላይ ፕሮላይን-4-hydroxylase (P4H) ከመጠን በላይ ለማምረት ጥቅም ላይ የዋለ ሲሆን የነጻ ኤል-ፕሮሊን ሃይድሮክሳይሌሽን ወደ ትራንስ-4-ሃይድሮክሲ-ኤል-ፕሮሊን ከ a-ketoglutarate (a-KG) ጋር እንደ ኮስብስትሬትስ የሚያደርገው ዳይኦክሲጅኔዝ ነው።በዚህ ባለ ሙሉ ሴል ባዮካታሊስት ውስጥ፣ ማዕከላዊ የካርቦን ሜታቦሊዝም አስፈላጊውን የ cosubstrate a-KG ያቀርባል፣ P4H biocatalytic አፈጻጸምን በቀጥታ ከካርቦን ሜታቦሊዝም እና ከሜታቦሊዝም እንቅስቃሴ ጋር በማጣመር።እንደ ሜታቦሊክ ኢንጂነሪንግ እና (13) ሲ-ሜታቦሊክ ፍሰት ትንተና ((13) ሲ-ኤምኤፍኤ) ያሉትን ሁለቱንም የሙከራ እና የስሌት ባዮሎጂ መሳሪያዎችን በመተግበር የሙሉ ሴል ባዮኬታሊስት ፊዚዮሎጂያዊ ፣ ሜታቦሊዝም እና ባዮኤነርጅታዊ ምላሽን መርምረናል እና በቁጥር ገለጽን። ለታለመው ባዮኮንቨርሽን እና ለቀጣይ ምክንያታዊ የመንገድ ኢንጂነሪንግ ሊሆኑ የሚችሉ የሜታቦሊክ ማነቆዎችን ለይቷል።የፕሮላይን መበላሸት ጉድለት ያለበት የኢ.ኮሊ ዝርያ የተገነባው የ putA ጂን ኮድ የፕሮላይን ዲሃይድሮጂንሴስን በመሰረዝ ነው።ሙሉ ሴል ባዮትራንስፎርሜሽን ከዚህ የሚውቴሽን ዝርያ ጋር ወደ መጠናዊ ፕሮላይን ሃይድሮክሳይሌሽን ብቻ ሳይሆን ከዱር አይነት ጋር ሲነፃፀር የልዩ ትራንስ-4-ኤል-ሃይድሮክሲፕሮሊን (hyp) አፈጣጠር መጠን በእጥፍ እንዲጨምር አድርጓል።የካርቦን ፍሰቱ በማዕከላዊው የሙታንት ዝርያ ሜታቦሊዝም ትንተና እንደሚያሳየው የ a-KG ፍላጎት የP4H እንቅስቃሴ መጨመር የ a-KG አመንጪ ፍሰትን አላሳደገውም፣ ይህም በተጠናው ሁኔታ ጥብቅ ቁጥጥር ያለው የ TCA ዑደት ስራን ያሳያል።በዱር ዝርያ ውስጥ, የፒ 4 ኤች ውህደት እና ካታሊሲስ የባዮማስ ምርትን መቀነስ አስከትሏል.የሚገርመው ነገር፣ የ ΔputA ዝርያ የቲሲኤ እንቅስቃሴን ከመጨመር ይልቅ የጥገና የኃይል ፍላጎቶችን በተነፃፃሪ ዝቅተኛ የግሉኮስ መጠን በመቀነስ የተጎዳኘውን ATP እና NADH ኪሳራ በማካካስ። በባዮትራንስፎርሜሽን ምርት ላይ ብቻ ሳይሆን የባዮትራንስፎርሜሽን እና የፕሮላይን አወሳሰድ እና በሃይል ምንጭ ላይ ያለውን የሂፕ ምርትን በተመለከተ ለምርታማ P4H ካታሊሲስ ተስፋ ሰጭ መሆን።ውጤቶቹ እንደሚያመለክቱት በ putA knockout ላይ የቲሲኤ-ዑደትን ከፕሮላይን ሃይድሮክሳይሌሽን በ cosubstrate a-KG በኩል ማጣመር ቁልፍ ምክንያት የሚገድብ እና የ a-KG ጥገኛ ባዮትራንስፎርሜሽን ውጤታማነትን የበለጠ ለማሻሻል ኢላማ ይሆናል።