ምርቶች

LecA (PA-IL) ሃይድሮፎቢክ ጋላክቶሲዶችን ከከፍተኛ ልዩነት እና ተያያዥነት ጋር የሚያቆራኝ በፕሴዩዶሞናስ ኤሩጊኖሳ የሚመረተው ሳይቶቶክሲካል ሌክቲን እና adhesin ነው።የ lecA-egfp የትርጉም ውህደት እና የባዮፊልም ኤክስትራሴሉላር ማትሪክስ ትንታኔን በመጠቀም lecA በባዮፊልም ባደጉ ሕዋሳት ውስጥ እንደሚገለጽ እናሳያለን።በሁለቱም በ polystyrene እና በአይዝጌ አረብ ብረት ላይ በተደረጉ የማይለዋወጥ የባዮፊልም ሙከራዎች የባዮፊልም ጥልቀት እና የገጽታ ሽፋን በ lecA ሚውቴሽን ቀንሷል እና በሌክኤ-ከመጠን በላይ በሚያመነጨው PAO-P47 ውስጥ ተሻሽሏል።የባዮፊልም የገጽታ ሽፋን በወላጅ ውጥረት፣ PAO-P47 ነገር ግን በብረት ኩፖኖች ላይ ያለው የ lecA ሚውቴሽን እንዲሁ በ isopropyl-beta-D-thiogalactoside (IPTG) ወይም p-nitrophenyl-alpha-D-galactoside (በሚገኙበት እድገት) ታግዷል። NPG)በተጨማሪም እነዚህ ሃይድሮፎቢክ ጋላክቶሲዶች በሌሉበት የተፈጠሩ የጎለመሱ የዱር ባዮፊልሞች አይፒቲጂ በመጨመር ሊበተኑ ይችላሉ።በአንጻሩ ለ P. aeruginosa LecB (PA-IIL) lecti n ከፍተኛ ቁርኝት ያለው የ p-nitrophenyl-alpha-L-fucose (NPF) መጨመር በባዮፊልም መፈጠር ወይም መበታተን ላይ ምንም ተጽእኖ አልነበረውም.የ P. aeruginosa PAO1 የፕላንክቶኒክ እድገት በ IPTG ፣ NPG ወይም NPF መገኘት አልተጎዳም ፣ ወይም ውጥረቱ እነዚህን ስኳር እንደ የካርቦን ምንጮች ሊጠቀም አልቻለም ፣ ይህም በባዮፊልም ምስረታ ላይ የታዩት ተፅእኖዎች የ LecA-ligand ውድድርን በመከልከል ምክንያት እንደሆኑ ይጠቁማል ። ማሰር.በብረት ኩፖኖች ላይ በተለዋዋጭ ፍሰት ሁኔታ ለሚበቅሉ ባዮፊልሞችም ተመሳሳይ ውጤቶች ተገኝተዋል፣ይህም LecA ለ P. aeruginosa biofilm architecture በተለያዩ የአካባቢ ሁኔታዎች ውስጥ አስተዋፅኦ እንደሚያደርግ ይጠቁማል።

የ t-fucosyl ቀሪዎችን ከ xyloglucan oligosaccharides የጎን ሰንሰለት ለመልቀቅ የሚችል አልፋ-ኤል-ፉኮሲዳሴ (EC 3.2.1.51) በአረቢዶፕሲስ ቅጠሎች ላይ ተገኝቷል።ከዚህም በላይ፣ በኤስዲኤስ-ገጽ ላይ አንድ ባንድ ለማቅረብ ተመሳሳይ የሆነ የሰብስትሬት ልዩነት ያለው አልፋ-ኤል-ፉኮሲዳሴ ከጎመን (Brassica oleracea) ቅጠሎች ተጠርጓል።ከዚህ የፕሮቲን ባንድ ሁለት የፔፕታይድ ቅደም ተከተሎች የተገኙ ሲሆን እነሱም AtFXG1 ለመጥራት ያቀረብነውን የአልፋ-ፉኮሲዳሴን የአረብኛ ጂን ኮድ ለመለየት ጥቅም ላይ ውለው ነበር።በተጨማሪም፣ ግብረ-ሰዶማዊነት ያለው አረብኛ ጂን ከታወቁት alpha-L-fucosidases ጋር ተገኝቷል፣ እና እሱን AtFUC1 ብለን እንድንሰይመው ሐሳብ አቅርበናል።ሁለቱም AtFXG1 እና ATFUC1 በፒቺያ ፓስተር ህዋሶች እና በባህል ማእከላዊ ሚስጥራዊ በሆነው የአልፋ-ኤል-ፉኮሲዳሴ እንቅስቃሴዎች ውስጥ በሄትሮሎጂ ተገልጸዋል።በ AtFXG1 የተመዘገበው አልፋ-ኤል-ፉኮሲዳሴ በኦሊጎሳካርዴድ ከ xyloglucan XXFG እንዲሁም በ2'-fucosyl-lactitol ላይ ንቁ ነበር ነገር ግን በp-nitrophenyl-alpha-L-fucopyranoside ላይ አልነበረም።ሆኖም፣ የ AtFUC1 heterologically የተገለጸው በ2'-fucosyl-lactitol ላይ ብቻ ነው።ስለዚህ, የመጀመሪያው ከ xyloglucan ተፈጭቶ ጋር የተያያዘ መሆን አለበት.