ምርቶች

ትሪስ አሲቴት ጨው በ TAE (Tris-acetate-EDTA) ቋት ዝግጅት ውስጥ በተደጋጋሚ ጥቅም ላይ ይውላል, እሱም እንደ ሩጫ ቋት እና በአጋሮዝ ጄል ውስጥ ጥቅም ላይ ይውላል.Tris Acetate-EDTA ቋት ለDNA agarose gel electrophoresis ጥቅም ላይ ይውላል፣ነገር ግን denaturing ላልሆነ አር ኤን ኤ አጋሮዝ ጄል ኤሌክትሮፊሸርስ ጥቅም ላይ ይውላል።ድርብ-ክር ያለው ዲ ኤን ኤ ከሌሎች ማቋቋሚያዎች ይልቅ በTAE ውስጥ በፍጥነት ይሰራል እና በተራዘመ ኤሌክትሮፊዮርስስ ጊዜ ሊዳከም ይችላል።በተራዘመ ኤሌክትሮፊዮራይዝስ ወቅት የቋት ዝውውር ወይም ቋት መተካት የታችኛውን የማቋት አቅምን ማስተካከል ይችላል።በመፍትሔ ውስጥ ያለውን የዲ ኤን ኤ ተንቀሳቃሽነት ለማጥናት በተለያየ መጠን ጥቅም ላይ ሊውል ይችላል።በTBE ቋት (Tris-Borate-EDTA Buffer, 10X Powder Pack, sc-296651) ውስጥ ያለው ቦሬት ለብዙ ኢንዛይሞች ጠንካራ መከላከያ ስለሆነ፣ የTAE ቋት ለዲኤንኤ ናሙና ኢንዛይም አፕሊኬሽኖችን ሲመለከት ይመከራል።ትሪስ አሲቴት ጨው ከፋየርፍሊ ሉሲፈራዝ ​​ጋር በ ATP ሙከራዎች ውስጥ ከፍተኛ ስሜት ያለው ቋት ነው።

ይጠቀማል፡ የTAE ሩጫ ቋት በብዛት ጥቅም ላይ የሚውለው ለDNA agarose gel electrophoresis ቋት ነው፣ እና ለአገር በቀል አር ኤን ኤ አጋሮዝ ጄል ኤሌክትሮፊዮሬሲስም ያገለግላል።ድርብ-ክር ያለው ዲ ኤን ኤ ከሌሎች ማቋቋሚያዎች በበለጠ ፍጥነት የመንቀሳቀስ አዝማሚያ አለው፣ ነገር ግን በረጅም ኤሌክትሮፊዮራይዝስ ወቅት ቋት ionዎች በመሟጠጡ ምክንያት መዋኘት ተስኖታል።ረዥም ኤሌክትሮፊዮራይዝ በሚደረግበት ጊዜ የቋጥኝ ብስክሌት ወይም የቋት መለዋወጥ የታችኛውን የመጠለያ አቅም ማካካስ ይችላል።2 40 mM Tris acetate እና 1 mM EDTA፣ pH 8.3 የያዘ 1 mMTAE ቋት ለማግኘት የተጠናከረውን የTAE ቋት ይቀንሱ።1 mMTAE ቋት ለሁለቱም በአጋሮዝ ጄል እና እንደ መሮጫ ቋት ሊያገለግል ይችላል።ለከፍተኛ ጥራት, የተተገበረው ቮልቴጅ ከ 5V / ሴሜ ያነሰ (በአሃድ ኤሌክትሮዶች መካከል ያለው ርቀት) እንዲሆን ይመከራል.

አፕሊኬሽን፡ የTAE ሩጫ ቋት በኬሚካል ቡክ ጄል ውስጥ ለዲኤንኤ አጋሮዝ ጄል ኤሌክትሮፊዮሬሲስ በብዛት ጥቅም ላይ የሚውለው ቋት ነው፣ እና እንዲሁም ላልሆነ ዲናቲሪንግ አር ኤን ኤ አጋሮዝ ጄል ኤሌክትሮፊዮሬሲስ ጥቅም ላይ ይውላል።ድርብ-ክር ያለው ዲ ኤን ኤ ከሌሎች ማቋቋሚያዎች በበለጠ ፍጥነት የመንቀሳቀስ አዝማሚያ አለው፣ ነገር ግን በረጅም ኤሌክትሮፊዮራይዝስ ወቅት ቋት ionዎች በመሟጠጡ ምክንያት መዋኘት ተስኖታል።ረዥም ኤሌክትሮፊዮራይዝ በሚደረግበት ጊዜ የቋጥኝ ብስክሌት ወይም የቋት መለዋወጥ የታችኛውን የመጠለያ አቅም ማካካስ ይችላል።የተጠናከረው የTAE ቋት 40 mM Tris acetate እና 1 mM EDTA፣ pH 8.3 የያዘ 1 mMTAE ቋት ለማግኘት ተሟጧል።1 mMTAE ቋት ለሁለቱም በአጋሮዝ ጄል እና እንደ መሮጫ ቋት ሊያገለግል ይችላል።ለከፍተኛ ጥራት, የተተገበረው ቮልቴጅ ከ 5V / ሴሜ ያነሰ (በአሃድ ኤሌክትሮዶች መካከል ያለው ርቀት) እንዲሆን ይመከራል.

የሚጠቀመው፡ ATP በፋየርፍሊ ሉሲፈራዝ ​​ሲታወቅ ይህ ምርት በጣም ስሱ ቋት ነው።የ glutamate ማሰሪያ መለየት.

ሊፈናቀል የሚችል የ[3H] l-glutamic acid ተቀባይ ካልሆኑ ቁሶች ጋር ማሰር።

[3H] ኤል-ግሉታሚክ አሲድ ከማይክሮፉጅ ቱቦዎች እና መስታወት ጋር የሚያያዝ በአራት ቋት ውስጥ ተመርምሯል።ከእነዚህ ቁሳቁሶች ጋር የዳራ ትስስር እዚህ ግባ የሚባል አልነበረም፣ ነገር ግን በTris-HCl እና Tris-citrate ቋት ውስጥ በሴንትሪፉግሽን ወይም በመምጠጥ ጨምሯል።ይህ ማሰር በጣም ያነሰ ነበር ወይም በምትኩ HEPES-KOH፣ ወይም Tris-acetate buffer ጥቅም ላይ ሲውል ነበር።[3H] L-glutamate ከማይክሮፉጅ ቱቦዎች ጋር ማገናኘት በኤል- ግን ዲ-ኢሶመርስ ኦፍ glutamate እና aspartate አልተከለከለም።DL-2-amino-7-phosphonoheptanoic አሲድ ማሰሪያውን አልከለከለውም.ከዝቅተኛ እስከ መካከለኛ መከልከልን የሚያሳዩ ሌሎች ውህዶች፡ N-methyl-D-aspartate፣ quisqualate፣ L-glutamic acid diethyl ester፣ N-methyl-L-aspartate፣ ካይኔት እና 2-amino-4-phosphonobutyrate።ማሰር በተደናበሩ የአይጥ የአንጎል ሽፋኖች ታግዷል።በTris-acetate ቋት ውስጥ ማሰር ሲደረግ በፕሮቲን ላይ የተመሰረተ [3H] glutamate ማሰሪያ የተገኘዉ በተደጋጋሚ በሚቀዘቅዝ የቀለጠ ሽፋን ዝግጅት ነው።በ glutamate binding assay ውስጥ Tris-acetate ወይም HEPES -KOH ቋት ጥቅም ላይ እንዲውል ይመከራል።Tris-HCl ወይም Tris-citrate ቋት ጥቅም ላይ ከዋለ፣ ከማይክሮፉጅ ቱቦዎች ወይም ከመስታወት ፋይበር ማጣሪያዎች ጋር ለማያያዝ ተገቢውን የቁጥጥር ሙከራ መደረግ አለበት።