ምርቶች

ዩካርዮቲክ ሴሎች ለጥቂት ደቂቃዎች ዲኤንኤ መባዛት በቂ የሆነ አራቱ ዲኦክሲራይቦኑክሊዮሲድ ትሪፎፌትስ (ዲኤንቲፒ) በደቂቃዎች ሚዛን ይይዛሉ።ሁለቱም የአንድ ዲኤንቲፒ እጥረት እና ትርፍ የሚውቴሽን መጠን መጨመር፣ የተሳሳተ የዲኤንኤ መጠገኛ ወይም ሚቶኮንድሪያል ዲኤንኤ መሟጠጥን ሊያስከትል ይችላል።ዲኤንቲፒ (ዲኤንቲፒ) ብዙውን ጊዜ የሚለካው በኢንዛይም ትንታኔ ሲሆን ራዲዮአክቲቭ dATP (ወይም ራዲዮአክቲቭ dTTP በዲኤንኤ ፖሊመሬሴ) ወደ ልዩ ሰው ሠራሽ ኦሊጎኑክሊዮታይድ ማካተት ከማይታወቅ ዲኤንቲፒ ትኩረት ጋር ተመጣጣኝ ነው።በተለምዶ ጥቅም ላይ የዋለው Klenow DNA polymerase ተጓዳኝ ራይቦኑክሊዮታይድ ላልታወቀ ዲኤንቲፒ ሊተካ እንደሚችል ደርሰንበታል።አሁን ለእያንዳንዱ ዲኤንቲፒ የሪቦኑክሊዮታይድ ውህደትን የሚያስወግዱ ሁኔታዎችን እንገልፃለን።ለ dTTP እና dATP ትንታኔዎች የ Klenow ኢንዛይም እና የተሰየመ dATP (ወይም dTTP) መጠንን ለመቀነስ በቂ ነው.ለdCTP እና dGTP t he Klenow ኢንዛይም በTaq DNA polymerase ወይም Thermo Sequenase መተካት ነበረብን።በአንዳንድ የቀደሙ ሪፖርቶች የሪቦኑክሊዮታይድ ውህደት ለdGTP እና dCTP በጣም ከፍተኛ ዋጋ እንዳስገኘ እንጠቁማለን።