ምርቶች

አዲስ ከፍተኛ አፈጻጸም ያለው ፈሳሽ ክሮማቶግራፊ ለ glycosyltransferases በአንትራኒሊክ አሲድ እና በፍሎረሰንት ማወቂያ ላይ የተመሠረተ።

የሁለቱም β1-4 galactosyltransferase (GalT-1) እና α2-6 sialyltransferase (ST-6) ከፍተኛ አፈጻጸም ባለው ፈሳሽ እንቅስቃሴዎችን ለመለካት የ2-aminobenzoic acid (2AA; anthranilic acid, AA) ልዩ መለያ ኬሚስትሪ በመጠቀም ትንታኔዎች ተዘጋጅተዋል። ክሮሞቶግራፊ (HPLC) በፍሎረሰንት ማወቂያ (Anumula KR. 2006. በፍሎረሰንት ዲሪቬታይዜሽን ዘዴዎች ውስጥ ያለው እድገቶች ለከፍተኛ አፈፃፀም ፈሳሽ chromatographic ትንተና የ glycoprotein ካርቦሃይድሬትስ. ፊንጢጣ ባዮኬም. 350: 1-23).N-Acetylglucosamine (GlcNAc) እና N-acetyllactosamine እንደ ተቀባይ እና ዩሪዲን diphosphate (UDP) - ጋላክቶስ እና cytidine monophosphate (CMP) -N-acetylneuraminic አሲድ (NANA) ለ GalT-1 እና ST-6 ለጋሾች እንደ በቅደም ተከተል.የኢንዛይም ምርቶች በ AA ውስጥ በቦታው ላይ ምልክት ተደርጎባቸዋል እና በ TSKgel Amide 80 አምድ ላይ ከሚገኙት ንጣፎች ተለይተዋል መደበኛ-ደረጃ ሁኔታዎችን በመጠቀም።የኢንዛይም አሃዶች የሚወሰኑት በአንድ ጊዜ ከተነሱት ደረጃዎች Gal-β1-4GlcNAc እና NANA-α2-6 Gal-β1-4GlcNAc ጋር በማነፃፀር ከከፍተኛ ቦታዎች ነው።የመስመር (የጊዜ እና የኢንዛይም ትኩረት) ትክክለኛነት (intra- እና interassay) እና ለምርመራዎቹ መራባት ተመስርተዋል።ትንታኔዎቹ በተናጥል እና በማጽዳት ጊዜ የኢንዛይም እንቅስቃሴዎችን ለመቆጣጠር ጠቃሚ ሆነው ተገኝተዋል።ግምገማዎቹ በጣም ስሜታዊ ነበሩ እና ከተለምዷዊ ራዲዮአክቲቭ ስኳር-ተኮር ልኬቶች ጋር እኩል ወይም የተሻሉ ነበሩ።ለካቦሃይድሬት ተቀባይዎች የመለያው የመቀነሻ መጨረሻ እስካላቸው ድረስ የፍተሻው ቅርፀቱ የሌሎችን የዝውውር እንቅስቃሴዎችን ለመለካት ሊያገለግል ይችላል።IgG ን በመጠቀም የ glycoprotein መቀበያ ቅኝት ተዘጋጅቷል።የ GalT-1 እና ST-6 እንቅስቃሴዎችን በፍጥነት ለመወሰን የሚያስችለውን IgG glycans (biantenary G0, G1, G2, mono- እና disialyated) ለመለየት አጭር የ HPLC መገለጫ ዘዴ ተዘጋጅቷል.በተጨማሪም ይህ የመገለጫ ዘዴ በ IgG glycans በክሊኒካዊ መቼቶች ውስጥ ለውጦችን ለመከታተል ጠቃሚ መሆን አለበት.