ONPG CAS፡369-07-3 98.0% ነጭ እስከ ጠፍቷል -ነጭ ዱቄት
| ካታሎግ ቁጥር | XD90006 |
| CAS | 369-07-3 |
| የምርት ስም | ONPG(2-Nitrophenyl-ቤታ-ዲ-ጋላክቶፒራኖሳይድ) |
| ሞለኪውላር ፎርሙላ | C12H15NO8 |
| ሞለኪውላዊ ክብደት | 301.25 |
| የማከማቻ ዝርዝሮች | ከ 2 እስከ 8 ° ሴ |
| የተቀናጀ የታሪፍ ኮድ | 29400000 |
የምርት ዝርዝር
| ንፅህና (HPLC) | ደቂቃ98.0% |
| መልክ | ነጭ ወደ ውጭ - ነጭ ዱቄት |
| መፍትሄ(በውሃ ውስጥ 1%;) | ግልጽ ፣ ቀለም የሌለው እስከ ትንሽ ቢጫ መፍትሄ |
| የውሃ ይዘት(ካርል ፊሸር) | ከፍተኛ.0.5% |
| የተወሰነ የጨረር ሽክርክሪት [α]D20(c=1፣H2O) | - 65.0 ° ሴ እስከ -73.0 ° ሴ |
በONPG ፈተና ላይ የተደረገ ውይይት (β-galactosidase ፈተና)
በቅርብ ጊዜ ጥያቄዎች በተደጋጋሚ ተነስተዋል፡ 1. የ ONPG ፈተና የዘገየ የላክቶስ መፍላትን ለመለየት ለምን ጥቅም ላይ ሊውል ይችላል?2. ለ ONPG ፈተና 3% ሶዲየም ክሎራይድ ትሪሳካራይድ ብረት (ወይም ትራይሳካራይድ ብረት) መጠቀም አስፈላጊ እንደሆነ ብሔራዊ ደረጃው ለምን ይገልጻል?3. ለ Vibrio parahaemolyticus, የ OPNG ፈተናን ሲያካሂዱ, ቶሉኒን በደረጃው መሰረት በ dropwise መጨመር ለምን አስፈለገ?ተግባሩ ምንድን ነው?
ድርጅታችን ብዙ መረጃዎችን ገምግሟል፣ ጠቅለል አድርጎ አቅርቦታል እና ከዚህ በታች አጋርቶዎታል።
መርህ፡ የ ONPG የቻይና ስም o-nitrobenzene-β-D-galactopyranoside ነው።ONPG ወደ ጋላክቶስ እና ቢጫ o-nitrophenol (ONP) በ β-galactosidase ወደ hydrolyzed ይቻላል, ስለዚህ β-galactosidase እንቅስቃሴ የባህል መካከለኛ ቀለም ለውጥ በማድረግ ሊታወቅ ይችላል.
ላክቶስ አብዛኞቹ ረቂቅ ተሕዋስያን ፈልጎ ማግኘት የሚያስፈልጋቸው ስኳር ነው።የእሱ ተፈጭቶ ሁለት ኢንዛይሞች ያስፈልገዋል, አንድ ሕዋስ permease ነው, ላክቶስ permease ያለውን እርምጃ ስር ሕዋሳት ውስጥ ይገባል;ሌላኛው β-galactosidase ነው, እሱም ላክቶስን ወደ ጋላክቶስ ውስጥ ሃይድሮላይዝ ያደርጋል.ላክቶስ እና ግሉኮስ.β-Galactosidase ወደ ጋላክቶስ እና ቢጫ ኦ-ኒትሮፊኖል (ኦኤንፒ) ሃይድሮላይዝድ ለማድረግ በቀጥታ በኦኤንፒጂ ላይ ሊሠራ ይችላል።በ 24 ሰአት ውስጥ, በላክቶስ ዘግይቶ ማዳበሪያዎች እንኳን ሊከናወን ይችላል.ስለዚህ ባህል 1 ን ከአጋር ስላንት በመምረጥ እና በ 36 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ውስጥ ለ 1-3 ሰአት እና 24 ሰአታት ሙሉ ክብ በመከተብ የተገኘውን ውጤት ያብራራል.β-galactosidase ከተመረተ, በ1-3h ውስጥ ወደ ቢጫነት ይለወጣል, እንደዚህ አይነት ኢንዛይም ከሌለ, በ 24h ውስጥ ቀለም አይለወጥም.
ከላይ ባሉት ሁለት ኢንዛይሞች መሠረት ረቂቅ ተሕዋስያን በሚከተሉት ምድቦች ሊከፈሉ ይችላሉ ።
1 ላክቶስ-ማፍላት (18-24 ሰአታት) ባክቴሪያ ከፐርሜዝ እና β-galactosidase P + G +;
2 የዘገዩ የላክቶስ ማዳበሪያዎች (ከ24 ሰአታት በላይ የሚወስዱ) ፐርሜዝ የሌላቸው ግን ጋላክቶሲዳሴ፡ ፒ-ጂ+ አላቸው።
3 ፐርሜዝ እና ጋላክቶሲዳሴ የሌላቸው ላክቶስ ያልሆኑ ማዳበሪያዎች፡- P-G-።
የ ONPG ፈተና የላክቶስ-ላግ-ፈላጊ ባክቴሪያዎችን (P-G+) ከማይቦካ የላክቶስ ባክቴሪያ (PG-) ለመለየት ጥቅም ላይ ሊውል ይችላል ለምሳሌ፡-
1 ዘግይቶ የላክቶስ fermenters (P-G+) ላክቶስ ካልሆኑት (P-G-) ይለዩ።
(ሀ) ሲትሮባክተር (+) እና ሳልሞኔላ አሪዞኔ (+) ከሳልሞኔላ (-)።
(ለ) Escherichia coli (+) ከ Shigella sonnei (-)።
በ3% ሶዲየም ክሎራይድ ፌሪክ ትሪሳቻራይድ (ብረት ትሪሳካራይድ) ላይ በአንድ ሌሊት ባህል በመጠቀም የONPG ምርመራ ለምን ተደረገ?ድርጅታችን ብዙ መረጃዎችን አማክሯል፣ ግን ግልጽ የሆነ መግለጫ የለም።በኤፍዲኤ ድረ-ገጽ ላይ ብቻ "ባህሎችን በሶስት እጥፍ ስኳር የብረት አጃር ስሊንት ላይ መከተብ እና ለ 18 ሰአታት በ 37 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ (ወይም ሌላ ተስማሚ የሙቀት መጠን ካስፈለገ) ይንቁ. 1.0 የያዙ ንጥረ ነገሮች (ወይም ሌላ) የ agar slants" ተብሎ ተጽፏል. % ላክቶስ እንዲሁ ጥቅም ላይ ሊውል ይችላል።ማለት: የሙከራው ባክቴሪያ በ trisaccharide ብረት መካከለኛ ላይ ተከተብ እና በ 37 ° ሴ ለ 18 ሰአታት ተክሏል.1% ላክቶስ የያዙ ንጥረ ነገሮች agar slants (ወይም ሌላ) መካከለኛ እንዲሁ ተቀባይነት አላቸው።ስለዚህ, የ trisaccharide ብረት መካከለኛ ላክቶስ እንደያዘ ይገመታል.በአንድ ሌሊት ካደጉ በኋላ ባክቴሪያዎቹ ጥሩ ንቁ β-galactosidase አፍርተዋል።እንደዚህ አይነት ባክቴሪያዎችን በመጠቀም ONPG በ β-galactosidase በፍጥነት ሊበሰብስ ይችላል.የሙከራው ክስተት ፈጣን እና በተሻለ ሁኔታ ይገለጻል.በተጨማሪም β-galactosidaseን ሙሉ በሙሉ ለመልቀቅ የቶሉይን ጠብታ መጨመር እና ለ 5 ደቂቃዎች የውሃ መታጠቢያ ሁሉም ናቸው.
